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单细胞转录组
单细胞转录组
单细胞转录组
简要概述

单细胞转录组测序(Single cell RNA sequencing, scRNA-seq)是在单细胞水平上对转录组进行测序的一项新技术,可以研究单个细胞内的基因表达情况。这项技术解决了用组织样本测序无法解决的细胞异质性难题,使得解析单个细胞的行为、机制及其与机体的关系成为了现实。

应用场景
01. 细胞图谱构建
可以全面解析组织或器官中的细胞类型及其亚群,构建全局细胞图谱。
02. 疾病研究
能够揭示疾病特性,探索相关标志物,特别是在肿瘤研究中。
03. 细胞发育轨迹分析
揭示细胞发育的分子机制和转录组动态变化。
04. 时序表达研究
鉴定外在特殊状态细胞并确定分化发育过程,解析微生物时序表达。

技术优势
  • 揭示细胞异质性

    能够在单个细胞水平上研究基因表达,解决细胞异质性的难题。

  • 识别细胞
    亚群

    可以识别各种细胞类型亚群,并研究它们的功能和特性。

  • 高分辨率

    研究细胞的异质性、发育分化、分子调控机制等。

  • 避免差异基因被掩盖

    避免传统的转录组测序基于组织中所有细胞表达量的均值。

  • 多组学分析

    可以与其他技术如染色质可及性测序等结合,进行多组学的综合分析。

技术流程
优秀案例

本研究生成了在出生后 4 个时间点(第 30、42、150 和 730 天)的 84,824 个猪肝细胞的单细胞转录组图谱,发现了 23 种细胞类型,包括三种罕见的细胞类型:浆细胞样树突状细胞、CAVIN3+ IGF2+ 内皮细胞和 EBF1+ 成纤维细胞。此外,鉴定了一组组织驻留的 NK 细胞,它们显示出病毒防御功能,在第 730 天保持增殖特征,并在人类肝脏中表现出比小鼠肝脏更高的保守转录因子表达模式。

图1 单细胞RNA测序(scRNA-seq)和单核RNA测序(snRNA-seq)鉴定发育中的肝细胞类型

图2 不同的肝细胞异质性和TF在发育过程中的动态活性

参考文献
Rao L, Cai L, Huang L. Single-cell dynamics of liver development in postnatal pigs. Sci Bull (Beijing). 2023;68(21):2583-2597. doi:10.1016/j.scib.2023.09.021
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